Identificación de proteínas membranales que participan en el mecanismo de adquisición de hierro cuando se usa como fuente Hb humana en Streptococcus pneumoniae

Abstract

RESUMEN "La mayoría de los estudios de los últimos 40 años han permitido dilucidar que los microorganismos patógenos dependen de hierro para su sobrevivencia, replicación (Weinberg, 2008) e inclusive para llevar a cabo el proceso infeccioso (Simpson, 2000 y Liu y col, 2006). Sin embargo, este elemento generalmente se encuentra unido a metaloproteínas en el humano. Actualmente, se sabe que los microorganismos que infectan al hombre han desarrollado mecanismos basados en receptores expresados a nivel de membrana para obtener este elemento de las fuentes disponibles en el húesped (Simpson, 2000 y Wandersman y col, 2004). Uno de los patógenos de mayor incidencia en infecciones nosocomiales es Streptococcus pneumoniae que causa infecciones como otitis media, sinusitis o neumonía hasta enfermedades invasoras como meningitis (Thornton, 2010). Se sabe que este patógeno al igual que otros requiere de hierro y hasta el momento se han descrito tres operones con cuatro genes denominados pit que codifican para proteínas que se requieren para la captación de hierro (Brown, 2002). Sin embargo, se desconocen los mecanismos necesarios para la adquisición de hierro para este microorganismo, por lo que, el entendimiento de estos es de gran importancia para un mejor control y manejo de enfermedades causadas por este patógeno. En este trabajo se logró crecer a la cepa R6 y se observó la capacidad de utilizar la Hb como fuente de hierro, el microorganismo se cultivó en caldo Todd-Hewitt, posteriormente se adicionó un agente quelante de hierro para eliminar la disponibilidad de hierro libre. Después el medio se suplementó con diferentes fuentes alternas de hierro. Se realizó el fraccionamiento celular del microorganismo para obtener la fracción membranal y purificar está mediante una técnica de cromatografía por afinidad al grupo hemo y finalmente se realizó la identificación de las proteínas de interés. S. pneumoniae tiene mecanismos para obtener hierro a partir de hemoglobina y hemina, pero no de otras fuentes disponibles en el humano como transferrina. De las siete proteínas que se identificaron por espectrometría de masas, seis poseen capacidad de unir hemo y cuatro unen al grupo hemo y Hb, además se especula que dos proteínas funcionan como probables receptores para la captación de hemo".