Análisis e identificación de proteínas de las células de intestino de Rhipicephalus microplus que interaccionan específicamente con fases sexuales de Babesia bigemina; agente causal de babesiosis

Abstract

"La babesiosis bovina es una enfermedad causada por protozoarios del género Babesia spp, que son transmitidos por garrapatas Rhipicephalus spp a su hospedero bovino. Esta enfermedad tiene un gran impacto económico no sólo por pérdida en la producción de leche y carne, sino por el aumento en los costos de producción, por los tratamientos a animales enfermos (Bock et al., 2004; FAO, 1981; Callow et al., 1993). Una estrategia importante que se ha planteado para el desarrollo de nuevas alternativas de control de la enfermedad, es el estudio de la relación que existe entre la garrapata y los patógenos que transmite. Dentro de la garrapata, Babesia spp interacciona con órganos internos del vector, lo cual es primordial para la transmisión del parásito hacia su hospedero vertebrado. A la fecha se desconocen las proteínas del intestino de la garrapata que permiten la interacción con Babesia spp; por lo que, el propósito del presente trabajo fue la identificación de proteínas del intestino de R. microplus que interaccionan con fases sexuales de B. bigemina. En este estudio se encontró que existen interacciones entre diferentes proteínas de intestino de la garrapata (con pesos moleculares en un rango de 25-100 kDa) con fases sexuales biotiniladas y que estas interacciones se pueden dar tanto con proteínas de membrana como con proteínas solubles del intestino. En ensayos de overlay en doble dimensión se detectaron seis manchas de proteínas que fueron analizadas por espectrometría de masas (LC/MS/MS). Por este método se identificaron tres proteínas: una glutamina sintetasa con una cobertura de identificación del 6% y dos proteínas mitocondriales que corresponden a una flavoproteína transportadora de electrones (cobertura de 28%) y un canal selectivo de aniones dependiente de voltaje ó porina mitocondrial (cobertura de 21%). Esta última participa en el proceso de apoptosis y se sobreexpresa durante la infección de otros patógenos a sus células blanco. La porina mitocondrial podría estar participando en la interacción con fases sexuales de B. bigemina inducidas in vitro. Este hallazgo inicial permitirá profundizar en la patogénesis y desarrollo de B. bigemina en el intestino de su vector para el establecimiento de métodos mejorados de control".