IDENTIFICACIÓN DE LAS POLI(A) RIBONUCLEASAS DE Entamoeba histolytica y ESTUDIO FUNCIONAL DE LA POLI(A) RIBONUCLEASA EhCAF1

Abstract

Este trabajo de investigación identifica y caracteriza la familia de poli(A) ribonucleasas (desadenilasas) en el protozoario patógeno Entamoeba histolytica, agente causal de la amibiasis. Mediante análisis in silico, se identificaron tres genes que codifican para las proteínas EhCAF1, EhCAF1-like y EhCCR4, las cuales conservan una alta homología estructural y funcional con sus ortólogos en Saccharomyces cerevisiae y Homo sapiens. Las proteínas EhCAF1 y EhCAF1-like contienen el dominio catalítico DEDD característico de la superfamilia de ribonucleasas D. Los análisis de expresión génica por RT-PCR demostraron que los transcritos Ehcaf1-like y Ehccr4 regulan su expresión de manera diferencial en respuesta a la inducción de daño al ADN por luz UV-C y por choque térmico, sugiriendo su participación en mecanismos de respuesta al estrés genotóxico. Finalmente, la proteína recombinante rEhCAF1-GST fue expresada, solubilizada y purificada, demostrando capacidad de unión específica al ARN mediante ensayos de movilidad electroforética (EMSA).