“Estudio y caracterización de la unión de la proteína VDAC DE Rhipicephalus microplus (BmVDAC) AL PLASMINÓGENO”

Abstract

RESUMEN "Rhipicephalus microplus es un ectoparásito del ganado bovino, el cual causa pérdidas económicas debido al daño directo del hospedero, los costos de tratamiento y la transmisión de patógenos. El uso de compuestos químicos contra estos ectoparásitos posee desventajas, ya que contaminan al medio ambiente, así como la carne y la leche de los bovinos infestados. Actualmente solo existe una vacuna contra R. microplus que no protege adecuadamente contra aislados de diferentes regiones geográficas por lo que el estudio de proteínas de garrapata es esencial para el desarrollo de una nueva vacuna. La proteína VDAC (BmVDAC) de R. microplus fue identificada anteriormente y probada como candidato vacunal con resultados satisfactorios. Adicionalmente, se demostró que BmVDAC interactúa con las fases sexuales de Babesia bigemina, y los niveles de la proteína aumentan en las garrapatas infectadas, por lo que fue de nuestro interés profundizar en los estudios sobre la posible función de esta proteína. En la presente investigación se determinó a través de un ensayo de ligando en membrana, que BmVDAC interactúa con el plasminógeno humano; en ensayos de unión en placa se demostró que esta interacción es específica y dependiente de la dosis. Por otra parte, esta unión disminuye significativamente en presencia de 10mM y 40mM del ácido ε-aminocaproico (εACA), un análogo de la lisina, cuya presencia se ha reportado como esencial en la interacción de proteínas con el plasminógeno. Asimismo, BmVDAC incrementa significativamente la activación del plasminógeno. Debido a que la comercialización del plasminógeno bovino está prohibida en México, para demostrar esta interacción con el plasminógeno bovino se obtuvieron los péptidos recombinantes correspondientes a los dominios kringle 4-5 y kringle 5 del plasminógeno bovino. Los resultados mostraron una interacción dosis dependiente entre los péptidos recombinantes y BmVDAC, de igual forma la interacción disminuyó significativamente en presencia de εACA (10, 20 y 40 mM). En este trabajo se demostró que BmVDAC interactúa específicamente con el dominio kringle 5 del plasminógeno bovino, lo que sugiere que BmVDAC puede encontrarse en la membrana de las células del intestino, realizando funciones diferentes a las que realiza en la mitocondria. Este es el primer estudio en el que se reporta la activación del plasminógeno mediante su interacción con VDAC de un organismo no mamífero (BmVDAC)".