Estudio de la relevancia funcional del RNA largo no codificante HOTAIR en el mimetismo vasculogénico dependiente de miR-204 en cáncer de mama

Abstract

Resumen El cáncer de mama es el tipo de cáncer más frecuente y la segunda causa de muerte más frecuente de mujeres en México, un fenómeno que empeora el pronóstico de los pacientes con este tipo de cáncer es la presencia de mimetismo vasculogénico el cual se define como la formación de redes tridimensionales de células no epiteliales para la obtención de oxígeno y nutrientes. Se ha demostrado la participación de proteínas como FAK. Los miRNA son moléculas de RNA pequeños de 20-25 nucleótidos que tienen un papel como reguladores postranscripcionales, el miR-204 se ha demostrado que inhibe la formación de mimetismo vasculogénico y se tenían indicios de que el RNA mensajero que codifica para la proteína FAK era uno de sus blancos directos. Recientemente se ha reconocido a los RNA largos no codificantes como reguladores de la expresión génica, uno de los mecanismos descritos mediante el cual realizan la regulación es la interacción directa secuencia específica con los miRNA, llamada esponja de miRNA, un RNA largo no codificante que se ha reportado que está sobre expresado en cáncer es HOTAIR, HOTAIR está sobre expresado en cáncer de mama y tiene una región semilla al miR-204. En el presente trabajo se demostró que la inhibición de HOTAIR disminuía significativamente la formación de mimetismo vasculogénico, también se disminuía la migración celular y se observó que la inhibición de HOTAIR disminuía la expresión de la proteína FAK. Se demostró la interacción secuencia específica entre el miR-204 y el lncRNA HOTAIR con un ensayo de actividad de luciferasa. Por último, se comprobó que el RNA mensajero que codifica para la proteína FAK es un blanco directo de miR-204. Abstract Breast cancer is the most frequent type of cancer and the second cause of death in Mexican women, vasculogenic mimicry is a feature in cancer that worsen the prognostic. Vasculogenic mimicry is the formation of three-dimensional networks of non-epithelial cells to obtain oxygen and nourishment. There are several molecules involved in the development of vasculogenic mimicry, one of them is FAK. miRNA are small RNA molecules of 20-25 nucleotides that are post transcriptional regulators, miR-204 has been proved that inhibits vasculogenic mimicry and that FAK could be one of his targets. Recently long non-coding RNA are emerging as the new regulators of gene expression, one of the mechanisms for this regulation is that they act as a sponge of miRNA, HOTAIR is an oncogenic lncRNA that is upregulated in breast cancer and contains a seed region to miR204. In this work we analyse the inhibition of HOTAIR diminishes the presence of vasculogenic mimicry and cell migration. The inhibition of HOTAIR which also reduce the abundance of FAK protein. Using a luciferase assay we proved the interaction between miR-204 and HOTAIR. Finally, we demonstrated that FAK is a direct target of miR-204.