Análisis comparativo del transcriptoma de cepas mexicanas del virus zika en células de mosquito

Abstract

"El virus del Zika (ZIKV) es un arbovirus (virus que se transmite de monos no humanos a humanos, mediante artrópodos) que se transmite principalmente por mosquitos. Este virus fué aislado por primera vez en macacos Rhesus en el año 1947, en el bosque “Zika” ubicado en Uganda y tiene como sus principales vectores a los mosquitos Aedes aegypti y Aedes albopictus. El ZIKV es de interés mundial por la enfermedad que se desarrolla en el humano al contraerlo llamada fiebre por zika. Esta enfermedad puede ser asintomática o presentarse con síntomas leves como fiebre, dolor de cabeza y erupciones cutáneas; pero también se pueden presentar complicaciones como el síndrome congénito por Zika en recién nacidos y el síndrome de Guillain-Barré en adultos. Hasta el día de hoy, no existen fármacos ni vacunas para esta enfermedad. Aunque varios estudios describen la interacción ZIKV-humano, se conoce muy poco de cómo el ZIKV interfiere en los procesos celulares del mosquito, por lo que en este estudio determinamos las diferencias en el transcriptoma de células infectadas con dos cepas mexicanas del ZIKV una aislada de un paciente (OAX) y otra de mosquitos infectados (31N), además se incluyó la cepa de referencia aislada de un paciente en Puerto Rico durante el primer brote registrado en América en 2015 (PR), usando una línea celular del mosquito Aedes albopictus (C6/36). Este análisis nos permitió identificar genes expresados diferencialmente (GED) en las células infectadas en comparación con células no infectadas. De esta forma se identificaron 117 GED en células infectadas con la cepa OAX y 16 GED en células infectadas con la cepa 31N (p < 0.05), mientras que la cepa PR no se observaron GED estadísticamente significativas. En las células infectadas con la cepa 31N destacaron 3 GED que no se identificaron en las células infectadas con las otras dos cepas de este virus: el cofactor putativo de formato inorgánico, Tomm7 y un gen que codifica una proteína no caracterizada de saliva. Posteriormente se realizó un análisis de enriquecimiento de términos de ontología de los GED, donde las categorías como síntesis de proteínas, el metabolismo de compuestos nitrogenados, procesos de homeostasis redox y la síntesis de ATP mostraban un enriquecimiento significativo. Por otro lado, se encontraron 13 GED compartidos en células infectadas con las cepas 31N y OAX, de éstos se seleccionó al gen Scylla con la finalidad de verificar su sobreexpresión mediante RT-qPCR. Los análisis estadísticos (T de Wetch) revelaron un aumento estadísticamente significativo en la expresión del gen Scylla especialmente en células infectadas con ZIKV 31N con respecto a las células no infectadas. Por todo lo anterior, concluimos que el transcriptoma de las células infectadas con las cepas mexicanas de ZIKV de humanos y de mosquito presentan GED coincidentes en ambos casos, sin embargo, también se presentan GED exclusivos de la cepa de mosquito (31N), los cuales podrían ser estudiados posteriormente para determinar su papel en la infección por el ZIKV".