Caracterización de un modelo Murino de tuberculosis latente

Tovar Vázquez, Blanca Estela

Use el DOI o este identificador para enlazar este recurso: http://repositorioinstitucionaluacm.mx/jspui/handle/123456789/2190

Título :	Caracterización de un modelo Murino de tuberculosis latente
Autor(es):	Tovar Vázquez, Blanca Estela
Asesor(es) :	Castañón Arreola, Mauricio Barrios Payán, Jorge Alberto López Cánovas, Lilia (asesor) Martínez Benítez, Máximo Berto (asesor) RESUMEN: La tuberculosis (TB) es una enfermedad infecciosa de importancia mundial, causada en gran proporcion por el bacilo Mycobacterium tuberculosis. Se estima que un cuarto de la poblacion mundial está infectada con el bacilo, manteniendo un estado asintomatico denominado tuberculosis latente (LTBI). Esta condición puede mantenerse en el individuo durante toda su vida, y ante un evento de inmunosupresion, puede reactivarse la infección estableciendose una enfermedad activa. El conocimiento sobre la infección latente es escaso debido especialmente a la carencia de un modelo in vivo de infeccion latente inducida naturalmente. En el presente estudio, se planteo la caracterizacion de un modelo murino de tuberculosis latente basado en una dosis baja de infeccion, que permite establecer un control inmune por parte del hospedero, promoviendo la transicion de las micobacterias a un estado de latencia. Se utilizaron ratones macho de la cepa BALB/c, que fueron infectados con la cepa de M. tuberculosis H37Rv. Se evaluo la carga bacilar en pulmon a los 7, 30, 150 y 210 días post-infeccion, y se seleccionaron los animales negativos por cultivo, en los cuales fue evaluada la presencia de DNA de M. tuberculosis en tejido pulmonar, así como la expresion de genes de la micobacteria asociados al estado latente, tanto en tejido pulmonar como extrapulmonar. Los resultados obtenidos, revelaron que al infectar intratraquealmente a los ratones con dosis de 10 UFC, se establece un control adecuado de la infeccion, manifestandose en ellos una infeccion latente. Esto fue comprobado mediante la deteccion de micobacterias viables no cultivables en tejido pulmonar y confirmando su diseminación a tejido extrapulmonar, característica de la infeccion latente en humanos. La viabilidad y el estado metabólico de la micobacteria se determinó mediante la detección de biomarcadores asociados a la latencia micobacteriana como: dosR, dosT, icl y hspX. Se encontró que el número de animales con infección latente aumenta con respecto al tiempo, teniendo a los 210 días post-infeccion (7 meses) el mayor porcentaje de estos. Nuestros resultados sugirieron que si se emplean dosis bajas de micobacterias se puede establecer una infección latente sin necesidad de administrar antibióticos. ABSTRACT: Tuberculosis (TB) is a worldwide infectious disease, which is caused by the bacillus Mycobacterium tuberculosis. About a quarter of the world's population is infected with the bacillus, which remains in an asymptomatic state, known as latent tuberculosis infection. This condition can be maintained in the individual for a lifetime; however, latent tuberculosis infection (LTBI) can be reactivated with an immunosuppression event, establishing active disease. Knowledge about this disease stage is poor due to the lack of an in vivo model of LTBI naturally induced. The study aimed to characterize a murine LTBI model, evaluating a low dose of infection, which allowed establishing an immune control by the host, promoting the transition of mycobacteria to a state of latency. Male mice of the BALB / c strain were infected with the M. tuberculosis H37Rv strain and sacrifice kinetics was evaluated at 7, 30, 150, and 210 days post-infection. CFUs were determined in the lung to identify animals with negative culture, in which the presence of genetic material of M. tuberculosis was evaluated as well as latency genes expression, both in lung tissue and in extrapulmonary tissue. The results obtained revealed that in mice infected with doses of 10 CFU, adequate control of the infection is established by the immune system of some animals, manifesting in them a latent infection. This was corroborated detecting viable non-cultivable mycobacteria in lung tissue and confirming their spread to extrapulmonary tissue; it is characteristic of LTBI in humans. We confirm the viability besides the metabolic status, by detecting biomarkers expression associated with mycobacterial latency such as dosR, dosT, icl, and hspX. The number of animals with latent infection increases over time, being at 210 days post-infection (7 months), detecting the highest percentage. Our results suggested that establish a model of immunologically induced latent tuberculosis is possible using low doses of M. tuberculosis, without the administration of antibiotics to induce LTBI.
Título :	Caracterización de un modelo Murino de tuberculosis latente
Fecha de publicación :	ene-2021
Palabras clave :	Maestría en Ciencias Genómicas Tuberculosis — Modelos animales — Ratones de laboratorio Mycobacterium tuberculosis — Cepa H37Rv — Dinámica molecular Latencia (Infección) — Diagnóstico — Marcadores biológicos Respuesta inmune — Pulmón — Infecciones bacterianas Diagnóstico de laboratorio — Cultivo bacteriológico — Unidades formadoras de colonias ADN bacteriano — Técnicas de detección — Expresión génica Ratones BALB/c — Infección intratraqueal — Modelos experimentales Enzimas bacterianas — Isocitrato liasa (icl) — dosR (Gen) Biomedicina — Investigaciones — Tuberculosis latente Bacteriología médica — Tesis académicas
Abstract :	Esta investigación caracteriza un modelo murino de tuberculosis latente (LTBI) inducido naturalmente mediante una baja dosis de infección, evaluando el control inmunitario del hospedero. Se infectaron ratones macho BALB/c por vía intratraqueal con 10 UFC de la cepa Mycobacterium tuberculosis H37Rv, monitoreando la carga bacilar en pulmón a los 7, 30, 150 y 210 días postinfección. Los animales negativos por cultivo tradicional se analizaron mediante detección de DNA bacteriano y expresión de genes metabólicos. Los resultados demostraron la presencia de micobacterias viables no cultivables diseminadas en tejidos pulmonares y extrapulmonares. En conclusión, la detección activa de los biomarcadores moleculares dosR, dosT, icl y hspX confirmó la transición bacteriana al estado de latencia metabólica, el cual incrementa progresivamente con el tiempo sin requerir inducción por antibióticos.
URI :	http://repositorioinstitucionaluacm.mx/jspui/handle/123456789/2190
Aparece en las colecciones:	Tesis Maestría

Texto completo:

Archivo	Descripción	Tamaño	Formato
BLANCA ESTELA TOVAR VÁZQUEZ.pdf	PDF	3.21 MB	Adobe PDF	Visualizar/Abrir

Mostrar el registro Dublin Core completo del recurso